肉鸡葡萄球菌病和绿脓杆菌病的实验室诊断方法

  肉鸡葡萄球菌病和绿脓杆菌病的实验室诊断方法

   1.抽样镜检无菌操作,采取病死鸡的眼眶内分泌物、新鲜溃疡物、皮下水肿液、跗关节液、心脏、肝脏、脾脏、肺脏和胆汁,分别作涂片和触片,美蓝染色、镜检发现:在眼眶内分泌物和溃疡物中,均见到大量的小杆菌和球菌;在皮下水肿液和跗关节液中,仅见到球菌;在各种脏器组织中,均见到数量不等的小杆菌和球菌。

   2.分离培养无菌操作,采取上述病料接种于血清培养基中,37℃培养24小时,结果长出两种菌落:

  一种在血平板上形成光滑、湿润、隆起、圆形、黄色菌落,其中有的黄白色以后变成金黄色,直径1~5毫米;该菌接种于肉汤中,呈均匀混浊生长,有沉淀;该菌接种于鲜血培养基中,生长良好,呈β溶血;培养物涂片革兰染色、镜检,发现革兰阳性球菌,菌体直径0.7~1.0微米,细菌排列成不规则的集团或呈典型的葡萄串状。另一种在血平板上形成光滑、边缘整齐、微隆起的小菌落或融合成菌苔,最初透明,后呈淡灰色,产生淡绿色或暗绿色色素,弥漫于琼脂培养基中;该菌接种于肉汤中,呈均匀混浊生长,液面形成淡灰色的厚菌膜,管底有大量沉淀,培养物初呈绿色,以后变为褐色;该菌在血平板上生长良好,呈β溶血;培养物涂片革兰染色、镜检,发现革兰阴性小杆菌,长1.5微米,宽0.5~0.6微米,单短链。

   3.生化反应将分离到的两种细菌作生化鉴定。

  根据上述涂片镜检、分离培养、培养特性和生化反应,确定小杆菌为绿脓杆菌,球菌为金黄色葡萄球菌。根据现场调查、病鸡临床表现和病死鸡剖检病变,以及上述实验室检验结果,鸡群主要以病鸡眼结膜炎、排黄白色水样稀粪、发病率和病死率均很高为主要临床特征的急性传染病,确诊为AA肉鸡葡萄球菌病和绿脓杆菌病混合感染症。

  【药敏试验】将上述两种分离菌接种于血清培养基上,应用纸片法做药敏试验。结果如下:

   1.葡萄球菌高敏药:羧苄青霉素、氨苄青霉素、新霉素、青霉素、链霉素和庆大霉素;低敏药:磺胺和四环素。

   2.绿脓杆菌高敏药:庆大霉素;中敏药:红霉素;低敏药:卡那霉素、氯霉素和链霉素;耐药:青霉素、氨苄青霉素、四环素、洁霉素、头孢噻吩(先锋霉素Ⅰ)、头孢唑啉(先锋霉素Ⅴ)、痢特灵和磺胺。两种分离菌均对庆大霉素高度敏感,均属高敏药。

  

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